ENTOMOTOXICIDADE DO VENENO DE SAPO (RHINELLA ICTERICA) EM BARATAS (NAUPHOETA CINEREA)

Resumo

INTRODUÇÃO: Os sapos são animais venenosos de interesse biotecnológico devido aos compostos bioativos presentes no seu veneno. Rhinella icterica é uma espécie de anuro venenoso comum no Brasil, no qual a atividade biológica de seu veneno nunca foi descrita anteriormente. Este trabalho investigou os mecanismos da atividade entomotóxica do veneno do sapo R. icterica (VSRI). METODOLOGIA: O veneno foi extraído de sapos coletados no município de Derrubadas (RS), com autorização do Sistema de Autorização e Informação em Biodiversidade (SISBIO) licença de coletor n°: 24041-2. Baratas adultas Nauphoeta cinerea foram utilizadas como modelo experimental. A atividade neuromuscular do VSRI foi avaliada usando a preparação músculo coxal adutor metatorácico (MCAM) segundo descrito por Martinelli et al. (2014). A Cardiotoxicidade foi avaliada utilizando a preparação coração semi-isolada (CSI) de barata in vivo de acordo com Rodrigues et al., (2012), freqüência cardíaca foi contabilizada visualmente durante 30 min. O comportamento de higienização (grooming) foi medido conforme descrito em (Carrazoni et al., 2016). Para avaliar a atividade locomotora in vivo, quatro insetos foram filmados durante 10 min e os filmes analisados utilizando softwares conforme Adedara et al. (2015). odos os dados foram expressos como média ± erro (E.P.M), sendo os mesmos analisados pelo teste two-way ANOVA, seguido dos testes Tukey ou Dunnett, sendo considerado significativos quando P<0.05. RESULTADOS E DISCUSSÃO: O efeito do VSRI (20, 50 e 100 μg / g de peso animal) na MCAM resultou em bloqueio neuromuscular significativo, em registros de 120min (n = 6, p <0,001). O efeito de VSRI (1, 2, 4 e 8 μg / 200 μl) em CSI foi dose dependente com uma diminuição máxima da freqüência cardíaca (50 ± 4 batimentos / min) para a maior concentração, em 30min (n = 9, p < 0,05). O VSRI (2, 10 e 20 μg / g de peso animal) aumentou significativamente a atividade de grooming que foi prevenida pelo tratamento prévio com fentolamina (0,1 μg / g) (n = 30, p <0,05, respectivamente). As mesmas doses diminuíram significativamente a atividade de locomoção (n = 33, P <0,05) nas baratas, aumentando o número de episódios de imobilidade e o do tempo de parada dos animais. A atividade biológica do VSRI nas baratas afeta os sistemas nervosos central e periférico, cardiovascular e comportamental, provavelmente envolvendo a modulação da transmissão octopaminérgica e, no bloqueio da resposta contrátil em insetos sugere que toxinas presentes no veneno atuem possivelmente de duas maneiras, interagindo diretamente com os receptores glutamatérgicos, como um antagonista ou mesmo aumento a liberação gabaérgica pelo aumento da sinalização octopaminérgica no gânglio metatorácico. CONCLUSÃO: A atividade entomotóxica apresentada pelo veneno do sapo R. icterica, reforça o interesse preservacionista, demonstrando a aplicabilidade biotecnológica de um composto natural oriundo da fauna local.