METODOLOGIAS PARA DETERMINAÇÃO DE NITROGÊNIO

Resumo

Proteínas são um grupo de substâncias presentes em alimentos e participantes de diversas reações metabólicas indispensáveis em processos biológicos vegetais ou animais. Seu teor de nitrogênio (N) é em torno de 16%, principalmente na forma de aminoácidos e compostos nitrogenados. Sua determinação em amostras é feita por meio dos métodos de Kjeldahl ou de Dumas. Objetiva-se com este trabalho discutir por meio de revisão de literatura os métodos citados, com suas vantagens e desvantagens para utilização no Laboratório de Nutrição Animal e Forragicultura da Unipampa. Para tal foram consultadas marchas analíticas e artigos científicos que contemplassem a utilização das metodologias objetos deste estudo. O método Dumas foi desenvolvido em 1831 pelo químico francês Jean Baptiste Dumas, foi primeiro método descrito para análise de nitrogênio e proteína. Naquela época não se encontravam condições de realizá-lo, pois a tecnologia era limitante. Este que é realizado utilizando temperaturas elevadas ocasionando oxidação total da amostra na presença de oxigênio, imediatamente reduzindo os óxidos de nitrogênio e ocorrendo a detecção do nitrogênio molecular produzido. Apenas um equipamento é utilizado onde acontece a combustão, redução, separação e detecção, não sendo utilizados reagentes perigosos, é necessária pouca amostra e o resultado é apresentado, entre 4 e 10 minutos. O método Kjeldahl, foi criado em 1883 por um dinamarquês chamado Johan Kjeldahl, que revolucionou a quantificação de nitrogênio e proteína naquela época, com o passar dos anos o método sofreu algumas modificações, mas ainda hoje é o mais utilizado. Esta análise acontece em três etapas: digestão, destilação e titulação, levando algumas horas para apresentar os resultados. A amostra é digerida com ácido sulfúrico concentrado sob aquecimento, o que transforma todo o nitrogênio orgânico em íons amônio. Na próxima etapa a solução obtida é alcalinizada com hidróxido de sódio concentrado e a amônia produzida nessa etapa é destilada e captada por uma solução de ácido bórico, que então é titulada com ácido padronizado. O método de Dumas pode não apresentar elevada confiabilidade nos resultados, pois podem ocorrer divergências devido a baixa quantidade de amostra utilizada, atualmente ele vem ganhando destaque pela agilidade, produtividade e custo por análise. O método de Kjeldahl é mais tradicional, utilizando maiores quantidades de amostra e por este motivo apresenta menor chance de erros. Os dois métodos são considerados válidos pelas principais organizações internacionais deste meio e a opção de utilização um ou de outro vai depender principalmente da disponibilidade do equipamento, mão de obra qualificada e tempo para realização da análise.