MONITORIA DE ISOLAMENTO E SELEÇÃO DE MICRO-ORGANISMOS DO SOLO PARA O COMPONENTE CURRICULAR BIOTECNOLOGIA MICROBIANA

Resumo

O componente curricular de Biotecnologia Microbiana tem como objetivos descrever as qualidades de bactérias, leveduras e fungos filamentosos para a Biotecnologia, definir fermentação e as diferenças entre fermentação lática e alcoólica, aplicabilidades da produção de proteínas recombinantes na Biotecnologia, bem como processos de produção e purificação, evidenciar o papel de micro-organismos na produção de vacinas, dentre outros. No rol de aulas práticas realizadas durante o componente curricular no semestre 2015/1 está contida a aula de Isolamento e Seleção de Micro-organismos Produtores de Antibiótico a partir do Solo. O solo é o maior reservatório natural de micro-organismos que produzem antibióticos. Considerando que o solo é densamente habitado por micro-organismos, não causa surpresa que muitos fungos e bactérias tenham desenvolvido ¬métodos de inibir o crescimento de células adjacentes para promover o seu próprio. Basicamente, um antibiótico produzido por um determinado micro-organismo inibe o crescimento de um segundo. Bactérias dos gêneros Streptomyces e Bacillus, além dos gêneros de fungo Penicillium e Cephalosporium, são comumente encontrados no solo e sabe-se que produzem antibióticos no intuito de preservar o nicho que ocupam. Ainda que o solo historicamente seja a fonte mais acessada para isolar-se novos antibióticos, atualmente muitos dos antigos antibióticos vem sendo manipulados para modificar-se a sua estrutura química, gerando novas versões com características diferentes, mas o processo é caro e limitado. Portanto, a busca por novas moléculas é fundamental para áreas como a medicina. Nesta aula prática objetivou-se isolar bactérias e/ou fungos produtores de antibióticos a partir de amostras de solo. Foram isolados tanto fungos quanto bactérias utilizando meios específicos. O meio Luria-Bertani (LB) foi utilizado para o isolamento de bactérias e o meio Batata-Dextrose-Ágar (BDA) foi utilizado para o isolamento de fungos filamentosos, ambos em estado sólido. Os discentes do componente curricular foram orientados a coletar e pesar 1 g de amostras de solos aleatórios dentro da área do Campus São Gabriel. Após, os discentes suspenderam as amostras em 10 mL de água destilada estéril e homogeneizaram a suspensão. Foram feitas diluições seriadas de base 10 até 10 -6. Volumes de 0,1 mL das suspensões 10 -3 e 10 -6 foram plaqueadas nos meios utilizados com o auxílio de uma alça de Drigalski. As placas foram incubadas por aproximadamente 15 dias a 28 °C em uma incubadora B.O.D. com fotoperíodo. Após o crescimento e desenvolvimento dos micro-organismos presentes nas diluições de solo, foi realizado o teste de produção de antibiótico, adicionando-se uma suspensão de bactérias da espécie Escherichia coli por sobre as colônias. Após 24 h verificou-se a formação de halos de inibição de crescimento devido à produção de antibiótico pelos organismos previamente cultivados nas placas de Petri. Com nossos resultados, podemos concluir que tanto nas populações de bactérias (1 colônia) quanto de fungos filamentosos (1 colônia) foram observados halos de inibição, indicando potenciais produtores de antibiótico. Nessa atividade prática, os discentes puderam observar e realizar o procedimento pelo qual é feito o isolamento e seleção de micro-organismos produtores de antibióticos.