Avaliação do Dano Oxidativo Induzido pela Ciclofosfamida em Fígado de Camundongos e o Papel Protetor da Infusão do Chá Verde

Resumo

A ciclofosfamida (CF) é um agente alquilante, que sofre metabolização no fígado pelo citocromo P-450 para formar metabólitos ativos, como a mostarda fosfaramida e acroleína. A CF possui efeito citotóxico e imunossupressor, sendo usada no tratamento de diversos tipos de tumores e algumas doenças auto-imunes, entretanto, seu uso é limitado devido aos seus efeitos tóxicos secundários, que incluem aumento na produção de espécies reativas e consequente estresse oxidativo. O objetivo desse estudo foi avaliar o dano induzido por uma única administração de CF sobre o fígado de camundongos, e o possível papel protetor do chá verde. Foram utilizados 24 camundongos Swiss adultos machos, divididos em 4 grupos (grupo controle, grupo chá, grupo CF, grupo CF + chá verde, n=6), pesando cerca de 30-35g. Esses animais foram acondicionados em gabinete, no biotério central da Universidade Federal do Pampa, com ciclo 12h claro/escuro, em temperatura controlada 22°C ± 2°C, com água e comida ad libitum. A infusão do chá verde foi preparada diariamente em água destilada-deionizada a 95 100°C, na dose de 250 mg/kg/dia. Os animais receberam durante 14 dias, água estéril (grupo controle e grupo CF) ou infusão do chá verde (grupo chá e grupo CF + chá verde) via oral. No 14° dia, os animais receberam uma única dose de CF (100 mg/kg), via intraperitoneal, ou solução salina para os animais controles. Após 24 horas, os animais foram eutanasiados e o fígado foi removido, homogeneizado em Tris-HCl 50 mM, pH 7,4, centrifugado e o sobrenadante foi utilizado para a avaliação dos níveis de peroxidação lipídica (TBARS), oxidação protéica (proteína carbonil) e atividade da enzima glutationa-S-transferase (GST), conforme metodologias previamente descritas na literatura. Os resultados obtidos foram analisados através de ANOVA, utilizando post hoc de Duncan, considerando significativo quando p<0,05. O grupo que recebeu apenas CF apresentou aumento na peroxidação lipídica (110%), aumento na oxidação de proteínas (12%), e redução da atividade da enzima GST (26%), quando comparado ao grupo controle. O pré tratamento com a infusão do chá verde foi eficaz em proteger o fígado do dano induzido pela CF, em todos os parâmetros avaliados, mantendo-os aos níveis do controle. O dano oxidativo causado pelo quimioterápico foi evidenciado nesse estudo pelo aumento nos níveis de TBARS e proteína carbonil. Além disso, CF também reduziu a atividade da GST, importante enzima de detoxificação contra xenobióticos. Estes danos podem estar relacionados ao metabólito acroleína, o qual é conhecido por induzir dano oxidativo. A infusão do chá verde apresentou efeito protetor sobre o fígado e esse efeito se deve, provavelmente, à grande quantidade de catequinas presentes no chá, o que lhe confere capacidade antioxidante. Conclui-se que a CF induz dano oxidativo em fígado de camundongos, mesmo após única administração, e que o pré-tratamento com o chá verde é eficaz em proteger contra esse dano.