Utilização de Glicerina Bruta para Obtenção de Goma Gelana por Sphingomonas paucimobilis NRRL B-54

Resumo

Sendo o petróleo um combustível não renovável, com previsão de esgotamento, cada vez mais tem-se buscado combustíveis alternativos, como o biodiesel, cujo processo gera glicerina como principal coproduto, resultando em um excedente não absorvido pelo mercado, justificando assim, o uso desta como fonte de carbono na obtenção de bioprodutos, tais como exopolissacarídeos bacterianos. A bactéria Sphingomonas paucimobilis é capaz de produzir goma gelana, a qual possui vasta aplicação em alimentos, na indústria farmacêutica e outras. O objetivo deste trabalho foi avaliar a substituição, parcial ou total, da sacarose por glicerina bruta, na produção de goma gelana. A linhagem de Sphingomonas paucimobilis NRRL B-54 foi incubada em estufa (30ºC-48h). O inóculo foi preparado partindo de um tubo contendo a cultura e 10 mL de diluente, a fim de resultar em uma suspensão de células. Esta foi adicionada a 90mL do meio de crescimento composto por (g.L-1): 20 glicose; 5 peptona; 3 extrato de levedura; 5 NaCl; 20 ágar, incubando-se a 30ºC e 150rpm por 12h, acompanhando-se a densidade ótica até atingir a fase de crescimento exponencial, o que corresponde a uma concentração celular em torno de 108 UFC/mL. Após a etapa anterior, 10mL do meio de crescimento foram transferidos para 90mL de meio contendo (g.L-1): 20 fonte de carbono; 10 Na2HPO4; 1 K2SO4; 1 NaCl; 0,15 (NH4)2SO4; 0,2 MgSO4.7H2O; 0,01 CaCl2.2H2O; 0,001 FeSO4.7H2O; 0,5 extrato de levedura, sendo utilizado como fonte de carbono a sacarose, a mistura de glicerina bruta e sacarose (1:1m/m) e glicerina bruta, sendo então incubados a 30ºC-200rpm. A concentração de biomassa foi acompanhada por medida da absorvância a 560nm, convertendo-se em massa seca por uma curva padrão previamente determinada. A goma foi recuperada centrifugando-se o caldo por (30min-4ºC), seguido de adição de etanol 96,4 ºGL (1:4v/v) e armazenamento sob refrigeração (±4ºC-24h), novamente centrifugação e secagem em estufa a vácuo (50ºC) até peso constante. Os experimentos foram realizados em triplicata e o teste de Tukey foi aplicado a fim de verificar a existência de diferenças significativas entre os meios utilizados, a 95% de confiança. Em 48 h de cultivo, em relação à biomassa, houve diferença significativa entre as três fontes de carbono, obtendo-se 4,25±0,14a; 3,30±0,10b e 3,67±0,14c g/L quando utilizada a sacarose, a glicerina bruta e a mistura de ambas como fonte de carbono, respectivamente. As concentrações de goma gelana não diferiram significativamente entre si, sendo encontrado 6,77±0,53a; 7,17±0,34a e 8,11±0,71a g/L usando sacarose, mistura de sacarose e glicerina bruta e glicerina bruta, respectivamente. Desta forma, foi demonstrado ser possível a substituição total da sacarose por glicerina bruta no cultivo de Sphingomonas paucimobilis, visando à produção de goma gelana, sendo a glicerina uma matéria-prima de baixo custo e grande disponibilidade. Palavras-chave: Exopolissacarídeos, biopolímeros, glicerol. FAPERGS, CNPq e CAPES