EXPOSIÇÃO AO FUNGICIDA MANCOZEB INDUZ GENOTOXICIDADE E MORTE CELULAR EM LARVAS DE PEIXE-ZEBRA (DANIO RERIO)

Resumo

A livre comercialização e a ampla utilização de agroquímicos, são fatores que contribuem com os altos níveis de contaminação humana e ambiental. O fungicida de amplo espectro Mancozeb (MZ), desempenha um importante papel no mercado global de agroquímicos, além de ser um dos fungicidas mais utilizados em uma variedade de cultivos. Diversos estudos ligam seu uso a efeitos nocivos à saúde humana, constituindo a intoxicação de agricultores e consumidores um problema de saúde pública. Sua exposição pode estar relacionada ao surgimento de doenças neurodegenerativas, como a doença de Parkinson, tornando interessante a descrição de modelos experimentais que propiciem o estudo e a compreensão dos mecanismos associados as doenças neurodegenerativas. Considerando as vantagens do peixe-zebra e sua similaridade com mamíferos, acaba sendo uma ótima ferramenta para o estabelecimento destes modelos. Este trabalho buscou investigar se a exposição das larvas de peixe-zebra ao fungicida MZ induz processos apoptóticos e genotoxicidade. Todos os protocolos experimentais utilizados neste trabalho foram aprovados pelo comitê de ética local (CEUA/UNIPAMPA protocolo n° 003/2016). Em placas de 12 poços, larvas com 6 dias pós fertilização (dpf) foram expostas a água do sistema Zebtec (controle) e ao MZ (0,5 mg/L) por 24 horas. Ao término dos tratamentos foram realizados os ensaios de estado estável redox através da oxidação do DCF-DA, avaliação do processo apoptótico pelo método de Laranja de acridina e ensaio de genotoxicidade pelo teste do cometa. Para dados paramétricos, foi realizada análise One Way ANOVA seguido pelo teste post hoc de Tukey e teste t; quando não-paramétricos realizada pelo teste Kruskal-Wallis ou MannWhitney. Foram consideradas significativas quando p<0,05. A exposição de MZ nas concentrações de 0,25 e 0,5 mg/L aumentaram significativamente quando comparadas com o grupo controle, indicando um aumento na geração de espécies reativas de oxigênio. No teste de Laranja de Acridina, observou-se um amento significativo de células apoptóticas na região da cabeça e na cauda da larva do peixe-zebra quando comparado com o grupo controle. O teste de genotoxicidade evidenciou um aumento significativo no arraste da cauda do cometa e no comprimento total do cometa, indicativo de fragmentação do DNA. Neste estudo, nossos resultados também demonstraram que a exposição ao fungicida MZ aumentou a produção de espécies reativas de oxigênio, a qual pode estar relacionada ao aumento de processos de genotoxicidade, os quais podem ser desencadeados pela oxidação de biomoléculas e, também, levar a indução apoptótica observada. Nossos achados corroboram com estudo semelhante realizado durante o período de desenvolvimento embrionário do peixe-zebra. Tendo em vista nossos resultados, estudos mais aprofundados são necessários para elucidar os mecanismos da toxicidade exercida pelo composto neste modelo, buscando compreender também sua neurotoxicidade em humanos.