ENVOLVIMENTO DOS SISTEMAS MONOAMINÉRGICOS NA ENTOMOTOXICIDADE PERIFÉRICA DA UREASE CANAVALIA ENSIFORMIS

Resumo

Introdução: Entre os neurotransmissores centrais, existem algumas monoaminas importantes como a Dopamina, Octopamina e Serotonina que, além da sinalização, exercem a neuromodulação de variadas funções fisiológicas. Sintetizadas por plantas, fungos e bactérias as ureases são metaloenzimas que hidrolisam a ureia, possibilitando a sua utilização como fonte de nitrogênio (BRUNTON et al., 2012). Ureases são proteínas moonlighting, ou seja, desempenham diferentes atividades biológicas não relacionadas. A Jack Bean Urease (JBU) é produzida pela leguminosa Canavalia ensiformis sendo majoritariamente encontrada nas suas sementes. A neurotoxicidade da JBU e seus peptídeos derivados tornou-se objeto de estudo nas últimas décadas, devido a sua ampla gama de atuação em diferentes espécies de insetos, contudo seu mecanismo de ação permanece pouco compreendido (CARLINI et al., 2016; MARTINELLI et at., 2014) Objetivo: investigar a relação dos efeitos entomotóxicos da JBU em baratas da espécie Nauphoeta cinerea e os sistemas monoaminérgicos, através de utilização de fármacos antagonistas específicos. Materiais e métodos: Registros da Atividade Locomotora (RAL): foram realizados pela filmagem e o monitoramento do comportamento exploratório dos animais durante 10min. Preparação Músculo Coxal Adutor Metatorácico (MCAM): após a anestesia, a perna do animal foi amarrada e conectada a um transdutor isométrico acoplado a um sistema de registros eletromiográficos (120min). Resultados e discussão: No RAL (n=40) o caminho percorrido pelo grupo Controle Salina (CS) foi em média de 518±40 cm e o do JBU 1,5µg/g de animal foi de 128±13 enquanto em Fentolamina 0,6µg/g (bloqueador de receptor (bR) de Octopamina) 353±33, SCH 0,2µg/g (bR-Dopamina) 354±37, Mianserina 0,5µg/g (bR-Serotonina) 446±34 e Reserpina 0,3µg/g (bR-Monoaminas) 302±30. Nos grupos pré-tratados com antagonistas e posteriormente injetados com JBU 1,5µg/g os valores ficaram em 490±44 no Fentolamina, 385±37 no SCH, 186±20 no Mianserina e 302±31 no Reserpina. Na MCAM (n=6) a resposta contrátil dos controles oscilou de 100 a 91%, já a dose JBU 1,5µg/g diminuiu significativamente a contração a partir dos 40min chegando a 40%. Nos tratados com Fentolamina e Fentolamina + JBU 1,5µg/g não houve diferença estatística do CS diferindo apenas quando comparado a JBU 1,5µg/g. O mesmo é observado nos pré-tratados com SCH e Reserpina, no entanto o grupo tratado com Mianserina seguido de JBU apresentou pouca diferença de significância na comparação com a JBU 1,5µg/g. Para identificar a importância das vias nas mudanças causadas pela urease nas preparações, comparamos as diferenças estatísticas entre os controles JBU versus os antagonistas seguidos da injeção de JBU 1,5µg/g. Estas analises possibilitaram a compreensão de quais vias eram essenciais para a entomotoxicidade da proteína. Conclusão: Provavelmente o mecanismo de ação primário da JBU seja a alteração da modulação e/ou neurotransmissão dos sistemas octo-dopaminérgico.