EFEITO DA AUSÊNCIA DO SFB SOBRE CONTEÚDO LIPÍDICO E PRODUÇÃO IN VITRO DE EMBRIÕES BOVINOS

Resumo

A produção in vitro (PIV) de embriões é uma ferramenta que viabiliza o aumento de produtividade, de animais com genética diferenciada na cadeia produtiva. Um grande obstáculo para disseminação dessa tecnologia é a grande sensibilidade dos embriões PIV à criopreservação, quando comparado a embriões produzidos in vivo. Essa criotolerância reduzida está associada ao alto conteúdo lipídico presente no citoplasma desses embriões. Não se sabe por que o acúmulo ocorreu no citoplasma da célula embrionária, no entanto, especula-se que a suplementação com soro fetal bovino (SFB) no meio de cultura seja uma possível causa. O objetivo desse trabalho foi analisar o efeito da remoção do SFB na produção embrionária e no conteúdo lipídico de embriões PIV de maneira a auxiliar na compreensão dos efeitos desse componente na qualidade dos embriões e criotolerância. Os ovários recuperados de abatedouro foram utilizados para a obtenção dos oócitos que foram submetidos à maturação in vitro (MIV) e fertilização in vitro (FIV). Decorridas às 18h de FIV, os possíveis zigotos foram desnudados e distribuídos em dois grupos: grupo cultivado em meio mSOF livre de SFB e grupo controle cultivado com meio mSOF acrescido de 2,5% de SFB. Os zigotos foram cultivados em gotas de 90µL cobertos com óleo mineral em estufa com umidade saturada e atmosfera de 5% de CO2, 5% O2 e balanço de N2. Nos dias 7 e 8 de cultivo, os blastocistos foram coletados aleatoriamente (n=15 mSOF livre de SFB e n=15 mSOF+2,5% de SFB) para a avaliação. Foram corados pelo protocolo da coloração Sudan Black B e realizado a captura das imagens e posterior análise de mensuração do conteúdo lipídico em escalas de cinza através do programa Image J. Para a análise estatística dos dados foram submetidos ao test t com auxílio do software GraphPad Prism 5.0. Em nosso estudo, a remoção do SFB aumentou as taxas de clivagem em embriões cultivados em meio livre de soro. Contudo a produção de blastocistos clivados nos embriões cultivados em meio convencional com SFB foi superior. A presença do SFB no meio de cultivo embrionário vem sendo associada com o aumento do conteúdo lipídico em embriões PIV, influenciando diretamente na qualidade de produção e criotolerância dos embriões. Contudo em nosso estudo o conteúdo lipídico embrionário foi similar entre os grupos. Estudos que viabilizem a compreensão da interferência do meio ao metabolismo embrionário são necessários para que se possa viabilizar uma melhor utilização dos componentes empregados.