DESENVOLVIMENTO E VALIDAÇÃO DE METODOLOGIA PARA DETERMINAÇÃO DE DESOXINIVALENOL EM ARROZ POR HPLC/DAD

Resumo

O arroz é um dos cereais mais produzidos e consumidos mundialmente. Porém, como em outros cereais, pode sofrer contaminações de fungos produtores de micotoxinas no campo, na etapa de secagem ou no armazenamento dos grãos quando há condições favoráveis para o seu desenvolvimento. O desoxinivalenol (DON) é uma micotoxina produzida principalmente por fungos do gênero Fusarium e apresenta efeitos toxicológicos como diarreia, vômitos, efeitos teratogênicos e imunossupressores, além da recusa alimentar em animais. Na legislação brasileira está estabelecido o limite máximo de 750 µg.kg-1 para DON em arroz beneficiado e derivados, porém poucos trabalhos relataram sua determinação nessas matrizes. Dessa forma, faz-se necessário uma metodologia analítica capaz de detectar e quantificar DON, para posteriores análises do atendimento dos limites descritos na legislação. O trabalho teve por objetivo desenvolver e validar uma metodologia capaz de determinar a presença de DON em arroz integral parboilizado, através de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e detector de arranjo de diodos (DAD). Para o desenvolvimento da metodologia foi utilizado um cromatógrafo a 220 nm. A aquisição e análise de dados foi realizada pelo software Chromeleon versão 6.8. Foram testadas diferentes proporções da fase móvel, em modo isocrático, com fluxo de 1 mL.min-1 e volume de injeção 20 µL em temperatura ambiente. Para o preparo da solução estoque de DON foram utilizados 2,5 mg do padrão analítico com diluição em metanol. Avaliaram-se a seletividade, o limite de detecção e quantificação, a linearidade, a precisão, a exatidão (com extração modificada) e a robustez. A proporção de água:acetonitrila:metanol (90:5:5) foi a que apresentou melhor desempenho cromatográfico, com o pico do padrão em 21 minutos, sem interferentes da matriz. A linearidade da resposta do equipamento em relação a concentração do analito não teve desvio da linearidade e apresentou regressão linear significativa, em níveis de 5% de significância e coeficiente de correlação acima do preconizado pela legislação. A precisão esteve dentro dos limiteis aceitáveis, com desvio padrão menor que 2%. A extração utilizada foi eficiente, com recuperação próxima a 100%. O limite de detecção e quantificação foram de 0,069 µg.mL-1 e 0,23 µg.mL-1, respectivamente, demonstrando a sensibilidade do método. O método desenvolvido mostrou-se seletivo, linear, preciso, robusto e com limites de quantificação e detecção adequados, estando apto para ser utilizado para determinação de DON em arroz parboilizado integral, atendendo a legislação vigente.