AVALIAÇÃO DA REGIÃO PROMOTORA DO GENE DA TREALASE ÁCIDA EM VETORES REGULÁVEIS EM METARHIZIUM ANISOPLIAE

Resumo

Metarhizium anisopliae, fungo entomopatogênico, infecta seus hospedeiros de forma direta por processo multifatorial envolvendo pressão mecânica e secreção de hidrolases. A principal fonte energética presente na hemolinfa dos insetos é a trealose, logo, para utilizar este açúcar como nutriente, o fungo secreta trealase ácida. Porém, pouco sabe-se sobre elementos de regulação compreendidos no promotor deste gene. Sugere-se que devem haver elementos de repressão catabólica por glicose, bem como responsivos a trealose. O promotor da trealase ácida foi descrito por regular o gene a jusante induzindo sua expressão apenas na hemolinfa de hospedeiros e seu potencial de regulação permite uma otimização da expressão de genes de interesse. Assim, objetivamos avaliar a região promotora do gene da trealase ácida de M. anisopliae quanto ao potencial regulável por fonte de carbono. Linhagens transformadas de M. anisopliae portando os genes repórter GFP e yeCherry sob regulação do promotor de estudo foram previamente obtidas. As linhagens foram cultivadas em meio de indução/repressão por fonte de carbono por 7 dias. Extraiu-se o RNA total das amostras cultivadas que serviram de molde para síntese de cDNA utilizados em reação de RT-qPCR. Resultados preliminares das análises quantitativas para os genes repórter demonstram que há regulação promotora de fato.