Composição Química e Avaliação dos Efeitos da Infusão de Bauhinia forficata em um Modelo Experimental com Eritrócitos Humanos Expostos a Elevadas Concentrações de Glicose in vitro

Resumo

A hiperglicemia crônica determina uma série de fenômenos bioquímicos que estão envolvidos na gênese do estresse oxidativo no Diabetes mellitus. A Bauhinia forficata (BF), popularmente conhecida como pata-de-vaca, é uma das plantas mais utilizadas por diabéticos no sul do Brasil para o controle da hiperglicemia. Os objetivos deste trabalho foram avaliar a composição química da infusão de BF, assim como seus efeitos em um modelo experimental de dano oxidativo induzido por altas concentrações de glicose em eritrócitos humanos in vitro. Para isso, foram coletadas em tubos heparinizados, amostras de sangue de voluntários saudáveis. O sangue total foi centrifugado para separação da porção celular e lavado com solução salina. Os eritrócitos lavados foram incubados com diferentes concentrações de glicose (0 a 500 mM) e/ou chá de BF em três concentrações (0,1; 1 e 10mg/ml) e mantidos em um homogeinizador de sangue por 24 e 48 horas. Após o tempo de incubação as amostras foram precipitadas com ácido tricloroacético e centrifugadas para obtenção do sobrenadante que foi utilizado para as análises bioquímicas. A composição química da infusão de BF foi realizada por análise de cromatografia líquida acoplada a espetro de massas (LC-MS). Os principais flavonoides identificados por LC-MS foram quercetin-3-O-(2-rhamnosyl) rutinoside, kaempferol-3-O-(2-rhamnosyl) rutinoside, quercetin-3-O-rutinoside e kaempferol-3-O-rutinoside. Nas análises com eritrócitos humanos, foi observado um aumento significativo nos níveis de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS), nas concentrações de glicose de 250 a 500 mM após 24 e 48 horas de incubação (p≤0,05). O chá de BF foi eficaz em reduzir os níveis de TBA-RS apenas após 24 horas de incubação. Além disso, a concentração mais elevada de glicose (500 mM) diminuiu significativamente os níveis de tióis não proteicos (-SH) (p≤0,05), e o chá de BF na concentração de 1mg/ml foi efetivo em manter estes níveis semelhantes aos do controle. Estudos recentes têm demonstrado elevado teor de polifenois e flavonoides em diferentes extratos de plantas do gênero Bauhínia. Porém, nosso trabalho demonstrou a presença destes compostos na forma popular de utilização desta planta, a infusão. Sabe-se que os polifenois são largamente distribuídos no reino vegetal e que apresentam uma elevada capacidade antioxidante. Adicionalmente, o uso de eritrócitos como modelo experimental para o estudo da oxidação de biomembranas tem sido amplamente aceito, especialmente pelo fato de o aumento da peroxidação lipídica em eritrócitos estar associado a uma variedade de eventos patológicos, entre eles a hiperglicemia. Em conjunto, nossos resultados sugerem que os efeitos antioxidantes demonstrados podem estar relacionados aos flavonoides identificados no chá de BF e que estes podem ser os responsáveis pela redução dos níveis de TBA-RS e manutenção dos níveis de -SH em eritrócitos humanos expostos a altas concentrações de glicose in vitro.