Isolamento de leveduras silvestres com potencial para produção de lipase

Resumo

As lipases são enzimas que pertencem ao grupo das hidrolases sendo responsáveis por catalisar a conversão de triacilglicerois a ácidos graxos livres e glicerol. Amplamente encontradas na natureza, podem ser obtidas a partir de fontes de origem animal, vegetal e microbiana que merecem destaque quanto a maior estabilidade e especificidade quando comparadas às demais. Desta forma, a descoberta de novas lipases, a partir da seleção de micro-organismos, com características desejáveis e interessantes, abre promissoras perspectivas científicas e comerciais. Este estudo teve como objetivo isolar leveduras silvestres de resíduos oleosos provenientes de uma indústria de farinha de pescado com potencial de produzir lipase. Os micro-organismos foram isolados de amostras de farinha de pescado, óleo da prensagem da farinha e de resíduos do tanque da prensa da farinha. Inicialmente, os resíduos oleosos foram inoculados em água destilada estéril e mantidos a 25°C/24h. Após, as amostras foram inoculadas em placas com ágar Yeast Malt (YM) e incubadas a 25°C/48h, observando-se o crescimento das colônias. As cepas de leveduras produtoras de lipase foram selecionadas através da formação de um halo transparente ao redor das colônias, com diâmetro maior ou igual a 20 mm, quando cultivadas em placas contendo 0,5% de peptona, 0,3% de extrato de levedura, 2% de ágar e 0,1% de tributirina, pH 6,0 a temperatura de 30ºC/48h. A atividade enzimática foi estimada calculando-se o índice enzimático (IE), que expressa a relação do diâmetro da colônia pelo diâmetro do halo. As leveduras isoladas foram mantidas em tubos de ensaio de ágar YM inclinado, cobertas com óleo mineral e armazenadas sob refrigeração (4°C). A partir do ágar YM foi possível isolar 18 colônias. Das 18 colônias, 13 apresentaram halo de hidrólise maior ou igual a 20 mm de diâmetro, sendo 3 colônias isoladas da farinha de pescado, 5 do óleo da prensagem e 5 do tanque da prensa da farinha. Em relação ao IE, os micro-organismos isolados do resíduo do tanque da prensa foram os que apresentaram maiores índices (valor médio 0,7), revelando que os mesmos possuem as menores atividades enzimáticas. Enquanto que os micro-organismos isolados no óleo de prensagem obtiveram os menores valores de IE (valor médio 0,22). Assim, com os resultados obtidos foi possível notar que os resíduos oleosos são promissoras fontes para obtenção de leveduras potencialmente produtoras de lipase. As cepas das leveduras isoladas, juntamente com outros micro-organismos isolados de resíduos oleosos provenientes de indústrias localizadas nos municípios de Rio Grande (RS) e Pelotas (RS) serão testadas em cultivo submerso, avaliando-se a atividade hidrolítica e de esterificação, dando continuidade a este trabalho. Agradecimentos: Capes, CNPq