Avaliação In Vitro da Citotoxicidade do Zn em Células Leucocitárias Humanas

Resumo

O Zn é um elemento traço necessário para todas as células e tem, como papel primordial, atuar como coadjuvante no desenvolvimento, proliferação e diferenciação celulares em crescimento, além de regulação da atividade de algumas enzimas. Por outro lado, sabe-se que o Zn, em concentrações elevadas, pode causar dano às células. O objetivo deste trabalho foi de determinar a concentração de Zn capaz de iniciar processo de citotoxicidade em células leucocitárias humanas in vitro. Para isto, foi obtida uma suspensão leucocitária humana (SCLH) (104 células/mm3 em tampão PBS, pH 7,4), ajustada a partir de sangue venoso coletado de voluntários adultos e expostas por 1 h a diferentes tratamentos. Para o controle negativo foi utilizado SCLH; para o controle positivo, SCLH e H2O2 4 mM; para os testes, SCLH e diferentes concentrações de Zn, (2,5 μg/L, 5 μg/L, 100 μg/L, 15 μg/L e 20 μg/L). A análise, em triplicata, contabilizou 300 células por lâmina, após serem incubadas com azul de tripan 0,2%, segundo Burow et al. (1998), classificando-as como viáveis e não viáveis. Os dados foram tratados através da ANOVA de uma via, completada pelo teste de Bonferroni, p < 0,001. O número de registro de aprovação referente à coleta da matriz biológica deste estudo junto ao CEP da UFSM é 0089.0.243.000-07. Nos leucócitos expostos às concentrações de 5 a 20 µg/mL de Zn foi possível verificar uma redução na viabilidade celular de 20 a 42% (dose não dependente), enquanto que a inviabilidade celular para o controle positivo foi de 28% e para o controle negativo 4%. Esta última igual ao percentual encontrado para a concentração de 2,5 μg/L. Estes resultados demonstram, sob as condições testadas, que a partir da concentração de 5 µg/mL o Zn inicia processo de indução de citotoxicidade às células leucocitárias humanas.