Estudo do Ciclo Celular, Estresse Oxidativo e Fatores de Transcrição Durante o Tratamento de Linhagens de Células Leucêmicas com Cloreto de Cobalto

Resumo

A hipóxia é uma situação na qual o nível de oxigênio disponível está abaixo do necessário. Isto causa estresse nas células, retarda sua proliferação e pode causar morte celular por apoptose e necrose, dependendo do tipo celular. No entanto, alguns tipos de tumores conseguem tirar vantagem desta situação se tornando mais agressivo. Durante a hipóxia existe uma grande mudança no perfil de expressão gênica das células para poder suportar o estresse e não morrer. Entre os fatores de transcrição que regulam estas mudanças encontramos o Fator Induzível por Hipóxia 1 alfa (HIF-1α) o qual é constitutivamente expresso, porem, em condições de normóxia, é continuamente degradado, o que não acontece em condições de hipóxia, quando ele para de ser degradado, é translocado para o núcleo e cumpre a sua função como fator de transcrição. O outro fator é o NF-KB, que é ativado em condições de estresse e por tanto seria ativado em condições de hipóxia. Recentemente foi descrita uma associação entre espécies reativas de oxigênio (ROS) e esses fatores transcricionais. Cloreto de cobalto (CoCl2), um agente mimetizante das condições hipóxias, parece também aumentar a formação de ROS. Assim, CoCl2 poderia aumentar tanto a atividades do HIF-1α como de NF-kB, inibindo ou estimulando o crescimento tumoral. Além disso, estudos recentes sugerem um possível potencial clínico do CoCl2 no tratamento de leucemias, porém seus efeitos e mecanismos exatos em leucemias ainda não foram elucidados. Assim, os objetivos deste estudo foram investigar os efeitos da hipóxia mimetizada por CoCl2 na proliferação celular e possível indução de apoptose na linhagem celular K562, uma linhagem celular eritroleucêmica Ph+ amplamente utilizada como modelo para estudar drogas com capacidade anti-proliferativa. E também foram investigados por citometria de fluxo os efeitos do CoCl2 sobre o ciclo celular e indução de ROS. Foi feita a verificação das alterações no padrão de expressão de enzimas antioxidantes, bem como de outras proteínas, utilizando a técnica de western blot. Demonstrou-se que o tratamento com CoCl2 inibiu o crescimento celular e promoveu bloqueio do ciclo celular em G2/M e diminuiu ROS na linhagem celular. Assim, seu mecanismo poderia estar associado à indução de hipóxia, e diminuição do estresse oxidativo ou aumento numa via independente de ROS. Esses resultados indicam que o cobalto poderia ser uma boa opção terapêutica para tratamento de leucemia.