Modulação de Enzimas Antioxidantes Causado pelo Óleo de Pterodon Emarginatus Protege Contra Danos Oxidativos em Caenorhabditis elegans

Resumo

A oxidação é parte fundamental da vida aeróbica, assim, os radicais livres são produzidos naturalmente ou por alguma disfunção biológica. No organismo, encontram-se envolvidos na produção de energia, sinalização celular e síntese de substâncias biológicas. Porém, seu excesso apresenta efeitos prejudiciais, como peroxidação de lipídios de membrana, proteínas e DNA. Com o avanço dos conhecimentos sobre como o stress oxidativo participa da patologia de diversas doenças, há um interesse crescente em explorar substâncias naturais, por sua rica composição química e potencial efeito antioxidante. Pterodon emarginatus é uma espécie arbórea nativa distribuída em toda a área central do Brasil. Estudos fitoquímicos do gênero Pterodon revelaram a presença de constituintes antioxidantes como alcaloides e isoflavonas no óleo das sementes. O extrato alcoólico obtido das sementes do gênero Pterodon é usado popularmente como antirreumático, anti-inflamatório e analgésico. Neste contexto, este trabalho propõe a investigação dos efeitos farmacológicos do extrato hexânico do óleo de Pterodon emarginatus, relacionados ao seu potencial antioxidante in vivo. O nematóide Caenorhabditis elegans possui várias características que o tornam vantajoso como modelo para este tipo de pesquisa, tais como curto ciclo de vida, tamanho reduzido, corpo transparente e vias metabólicas bem esclarecidas. Todos os ensaios foram realizados com 1.500 animais em estágio L1, que foram tratados com o óleo de P. emarginatus com concentrações que variaram de 0 a 3 mg/ml durante 30 minutos. Logo após lavagens para remoção do extrato, os vermes foram colocados sob placas NGM/OP50 para posterior avaliação de parâmetros como: sobrevivência; capacidade de proteção do óleo frente a estresse oxidativo causado por paraquat (0,5 mM), FeSO4 (1,5 mM) e t-BOOHt (5 mM); longevidade dos animais; determinação dos níveis de espécies reativas de oxigênio (ROS) com 2,7-Diclorodihidrofluoresceína diacetato (DCF-DA) e níveis de enzimas antioxidantes, superóxido dismutase (SOD) e catalase marcadas com GFP. Os resultados obtidos indicam que a única concentração do extrato capaz de atingir a DL50 foi a de 3mg/mL, por tanto as concentrações utilizadas para os demais ensaios foram inferiores a esta. O óleo mostrou-se capaz em todas as concentrações de proteger os vermes, aumentando sua sobrevivência após exposição aos indutores de estresse FeSO4, paraquat e t-BOOH. Também foi observado o aumento da longevidade dos animais expostos ao óleo de P. emarginatus, per se. Estes resultados podem ser explicados pela diminuição observada na quantidade de ROS, assim como pelo aumento dos níveis de SOD, enzima que catalisa a dismutação do radical superóxido em oxigênio e peróxido de hidrogênio, e da catalase, que decompõe o peróxido de hidrogênio em água. Mediante os resultados obtidos, pode-se inferir que o óleo de Pterodon emarginatus possui potencial farmacológico, podendo ser explorado para a obtenção de compostos bioativos