Isolamento de Leveduras Presentes Naturalmente em Uvas Vitis Vinífera em Diferentes Meio de Cultura.

Resumo

Existem varias técnicas que permitem selecionar e isolar as cepas de leveduras a qual está cada vez mais difundida, entre elas, os meios de culturas que possuem em sua formulação nutrientes necessários para os micro-organismos multiplicarem-se, permitindo seu estudo e caracterização. Na indústria vinícola um dos avanços tecnológicos é o controle microbiológico do processo fermentativo por inoculação de leveduras selecionadas de Saccharomyces cerevisiae. Usam-se as leveduras secas ativas que estão acessíveis com distintas propostas de uso na fermentação, e com várias marcas a disposição na indústria enológica. O presente trabalho objetivou avaliar três meios de cultura distintos quanto ao isolamento de leveduras provenientes de uvas oriundas de vinhedos localizados no município de Dom Pedrito, no qual pertence à região da Campanha Gaúcha. Foram utilizadas uvas sãs e maduras de castas tintas Vitis vinífera L., as quais foram coletadas em recipientes esterilizados e acondicionadas sob-refrigeração até a análise, no laboratório de microbiologia da Universidade Federal do Pampa, Campus Dom Pedrito. As bagas foram cultivadas sobre os meios de cultura Ágar Sabouraud dextrose (SB), Ágar Potato dextrose 4% (PDA) e Ágar extrato de levedura e dextrose (YEPD), incubadas a 25oC por cinco dias, quando fez-se a análise morfológica das colônias crescidas. Observou-se crescimento de colônias compatíveis com leveduras apresentando coloração entre o branco e o creme e textura cremosa na microscopia observaram-se estruturas unicelulares ovais e circulares com presença ou não de brotamento. Verificou-se que não houve diferença entre os meios de cultivo quanto ao número de colônias isoladas, pois os três apresentaram 56 colônias, no entanto observou-se diferença entre os meios no que tange a intensidade de crescimento. Para mensuração desses resultados foram atribuídos escores que variaram entre satisfatório, regular e pouco satisfatório, esses foram analisados levando em consideração o crescimento das colônias nas placas. Com isso observou-se que no meio de cultivo PDA 96,4% (54/56) das colônias, no meio YEPD 60,71% (34/56), e no meio Sabouraud 51,7% (29/56), apresentaram crescimento leveduriforme satisfatório cobrindo a totalidade do meio, enquanto os que obtiveram crescimentos pouco satisfatórios foram Sabouraud 41,07% (23/56), YEPD 21,42% (12/56) e PDA 1,8 % (1/56). Os meios de culturas são formulações com nutrientes necessários para que os micro-organismos possam se manter e multiplicar permitindo sua análise. Os meios utilizados apresentam altas concentrações de açucares, porém com diferenças no Ph e em alguns constituintes podendo ter influenciado na intensidade do crescimento das colônias isoladas. Concluíse que não houve diferença entre os meios de cultura quanto ao número de isolamentos, no entanto, o meio Ágar Potato Dextrose obteve colônias leveduriformes com maior intensidade de crescimento, quando comparado com os dois outros meios utilizados.