AVALIAÇÃO DA RESISTÊNCIA DE CANDIDA ALBICANS ISOLADA DA MICROBIOTA ORAL

Resumo

Diferentes espécies de micro-organismos colonizam o corpo humano, e estas variam de acordo com cada indivíduo e devido a fatores como idade, dieta e hábitos de vida. A colonização da microbiota bucal inicia-se logo após o nascimento, onde bactérias e leveduras começam a fazer parte da cavidade oral da criança e, ao longo da vida as condições variáveis de cada indivíduo são responsáveis pela sucessão de micro-organismos. As leveduras do gênero Candida são micro-organismos residentes da microbiota e oportunistas, sendo a C. albicans a espécie mais comumente isolada em humanos. Com o uso indiscriminado de antifúngicos e uma menor descoberta de novos agentes antifúngicos em comparação aos agentes antibacterianos, o surgimento de isolados resistentes está sendo um dos grandes desafios do tratamento terapêutico. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi analisar o perfil de suscetibilidade aos antifúngicos anfotericina B e fluconazol e avaliar a atividade da bomba de efluxo como mecanismo de resistência nas leveduras isoladas da microbiota oral de voluntários saudáveis. Para quatro isolados de C. albicans foi determinada a Concentração Inibitória Mínima (CIM) pelo método de microdiluição em caldo, de acordo com o Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, 2008), testando os antifúngicos anfotericina B e fluconazol. Para avaliação da atividade da bomba de efluxo como mecanismo de resistência dos isolados, testou-se os antifúngicos combinados com prometazina, um inibidor da bomba de efluxo. As CIM dos testes foram determinadas visualmente com auxílio da solução de cloreto de 2,3,5-trifenil-tetrazólio (CTT) 0,5%. Os ensaios foram realizados em triplicata. Os quatro isolados de C. albicans foram resistentes aos dois antifúngicos avaliados. A combinação do inibidor da bomba de efluxo com anfotericina B reduziu a CIM em duas vezes para dois isolados, e nos outros dois não foram observadas reduções. Porém, quando testado o inibidor em combinação ao fluconazol a CIM reduziu em até duas vezes para três dos quatro isolados. Dessa forma, observou-se resistência dos quatro isolados testados, sendo que desses, três apresentaram a bomba de efluxo como mecanismo de resistência, mas a resistência não foi revertida com o uso do inibidor, o que pode ser indicativo de outro mecanismo de resistência presente nos isolados. No entanto, faz-se necessário aumentar o número de isolados avaliados para confirmar esses altos índices de resistência nessas leveduras oriundas da microbiota oral, bem como avaliar outros mecanismos de resistência que possam estar presentes nesses micro-organismos. Apoio: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES. Referências: CLSI. 2008. Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts; Approved StandardThird Edition. CLSI document M27-A3. Clinical and Laboratory Standards Institute, Wayne, PA, USA.