ESTABELECIMENTO DE MEIO DE CULTURA, SEM SUPLEMENTAÇÃO DE ÁGAR, PARA BRIÓFITAS COM POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO

Resumo

A superdivisão Bryophyta é o grupo de maior sucesso entre as plantas, destacando-se por número de espécies, diversidade de habitats e distribuição geográfica, pois são encontradas em todos os continentes. Dentro deste grupo encontram-se antóceros, hepáticas e musgos, e este último localizado dentro do Filo Bryophyta. A simplicidade de desenvolvimento dos musgos aliada à facilidade para aplicação de abordagens genéticas faz com que estes sejam amplamente utilizados em estudos de processos biológicos e moleculares em plantas. O musgo Physcomitrium acutifolium Broth., da família Funariaceae, é nativo do Rio Grande do Sul, em regiões de Floresta Atlântica do Brasil. Em vista disso, o objetivo do presente trabalho foi determinar o meio de cultura líquido ideal, para melhor crescimento, regeneração e desenvolvimento do musgo Physcomitrium acutifolium Broth. em culturas in vitro com temperatura, luz e agitação controladas. As amostras de Physcomitrium acutifolium Broth foram retiradas dos cultivos pré-estabelecidos no laboratório Núcleo de Estudos da Vegetação Antártica (N.E.V.A.) localizado na Unipampa, Campus são Gabriel, onde estavam mantidas em uma estufa de fotoperíodo com 8h luz e 16h escuro, e temperatura controlada de 20ºC. Os meios de cultivo testados foram KNOP e BCD, em tréplicas, sendo o KNOP+ME o meio pré-estabelecido e que gera um bom crescimento para esta espécie quando utilizado em meio sólido. Sem suplementação de ágar, os meios foram colocados em erlenmayers e vedados com papel filtro, gase, papel pardo e barbante e, posteriormente, autoclavados. Foi separado um gametófito de um indivíduo dos cultivos in vitro, este foi fragmentado para que facilitasse a observação da geração de biomassa, e inoculado nos meios de cultivo dentro de uma câmara de fluxo laminar. Após isso, os cultivos foram colocados em uma mesa agitadora com cerca de 6/7 rpm e mantidos em uma estufa de fotoperíodo. O tempo de avaliação foi de 7 dias, nos quais foram observados se havia contaminação, oxidação e crescimento da planta. Com este trabalho, podemos concluir que o meio KNOP líquido com agitação constante possui um grau de aproveitamento similar ao do meio KNOP+ME sólido já que os resultados foram semelhantes, porém o KNOP líquido apresentou os mesmos resultados em um menor espaço de tempo. Em uma perspectiva futura, os testes em comparação de eficiência dos meios de cultura serão aperfeiçoados, pesando as plantas ao final do experimento para uma melhor noção da geração de biomassa e utilizando outros meios de cultura.