A ESTIMULAÇÃO DA ÁREA TEGMENTAL VENTRAL REVERTE O DÉFICIT DE MEMÓRIA INDUZIDO PELA PRIVAÇÃO DE CUIDADOS NO INÍCIO DA VIDA

Resumo

A privação de cuidados no início da vida pode afetar o desenvolvimento e função de estruturas encefálicas importantes para os processos de consolidação e persistência da memória. Em roedores, o protocolo de Privação Materna (PM) promove privação de cuidados no início da vida, e leva a mudanças hormonais, neuroquímicas e genéticas, gerando alterações anátomo-funcionais no hipocampo. O sistema dopaminérgico hipocampal é importante tanto para o processo de consolidação, quanto para a persistência da memória de longa duração. Estudos recentes demonstram que a PM leva a prejuízos no processo de consolidação da memória de reconhecimento de objetos e que a estimulação hipocampal de receptores dopaminérgicos, além de reverter tais déficits, promove a persistência da memória até 14 dias após a sessão de aprendizagem. Além do hipocampo, estruturas encefálicas como amígdala basolateral, córtex pré-frontal e córtex entorrinal, também são afetadas pelo estresse no início da vida. Contudo, ainda não está claro como estruturas encefálicas mais baixas, como a área tegmental ventral (ATV) região com projeções dopaminérgicas para o hipocampo e ativada durante o processo de consolidação e persistência de memórias dependentes do hipocampo é afetada pela PM. Assim, objetivamos investigar o envolvimento do ATV no déficit de memória induzido pela PM. Para isso, ratas Wistar prenhas (n = 15) foram obtidas e acompanhadas até o dia do nascimento da prole (DPN-0). No dia pós-natal 1 (DPN1), metade da ninhada foi submetida a PM e a outra não. A PM consistiu em retirar a mãe da caixa-moradia 3h/dia, durante os 10 primeiros dias (DPN1 DPN10). As ninhadas foram transferidas para uma sala aquecida (aproximadamente 32ºC), para compensar a perda do calor corporal materno. No DPN90, os animais machos oriundos da prole foram anestesiados e submetidos à cirurgia estereotáxica para implantação de cânulas na região da ATV e posterior infusão de droga/salina, e foram subdivididos em 4 grupos: (i) Controle; (ii) PM; (iii) NMDA (agonista glutamatérgico dos receptores NMDA, capaz de promover estimulação de áreas com grande expressão destes receptores); (iv) PM + NMDA. Os animais dos grupos NMDA receberam infusão do fármaco imediatamente após a sessão de treino no teste de memória. O teste de memória utilizado foi o reconhecimento de objetos (RO). Primeiramente, os animais foram habituados ao aparato de RO durante 20 minutos/dia por 4 dias. No 5º dia (sessão de treino), os animais foram colocados no aparato com dois objetos diferentes para livre exploração por 5 min. As sessões de teste foram realizadas 24h (consolidação) e 7 dias (persistência) após a sessão de treino de RO, quando um dos objetos da sessão de treino foi substituído por um novo e foi permitida a livre exploração por 5 min. O tempo de exploração de cada objeto foi registrado e transformado em porcentagem do tempo total de exploração. Usamos o teste t de uma amostra para comparar a porcentagem do tempo total de exploração com uma média teórica de 50%. As diferenças foram consideradas estatisticamente significantes quando P < 0,05. Todos os procedimentos foram aprovados pelo CEUA/UNIPAMPA (protocolo 026/2021). Como esperado, já que ambos os objetos eram desconhecidos pelos animais, todos os grupos exploraram por um tempo similar os dois objetos (cerca de 50% do tempo total de exploração) durante a sessão de treino (P > 0,05). No teste de 24 h, os animais do grupo Controle (P = 0,0001) e NMDA (P = 0,0012) exploraram significativamente mais de 50% do tempo total de exploração o novo objeto, ou seja, formaram memória. Já o grupo PM explorou por um tempo similar o objeto familiar e o novo (P = 0,4646), sugerindo um déficit de memória. Os animais do grupo PM + NMDA, por sua vez exploraram mais de 50% do tempo total de exploração o novo objeto (P < 0,0001). Na avaliação da persistência da memória, os animais do grupo Controle exploraram por um tempo similar os dois objetos (P = 0,1411), sugerindo um esquecimento fisiológico. Ainda, animais do grupo PM gastaram um tempo similar explorando os dois objetos (P = 0,5184). Por outro lado, os grupos NMDA (P = 0,0006) e PM + NMDA (P = <0,0001) exploraram significativamente mais o objeto novo. Os resultados demonstram que a infusão do agonista glutamatérgico na ATV promoveu a consolidação e persistência da memória, revertendo o déficit induzido pela PM. Juntos, nossos resultados demonstram que a estimulação farmacológica da ATV, composta majoritariamente por neurônios dopaminérgicos com projeções para o hipocampo, tem potencial de melhorar a memória e reverter déficits de memória induzidos pela PM.