EFEITO DA UTILIZAÇÃO DE SELÊNIO EM DILUENTE PARA CRIOPRESERVAÇÃO DE SEMÊN OVINO
Rótulo
criopreservação, semên, ovino, suplementação
Resumo
Um dos principais interesses da cadeia de criação de ovinos no Brasil, baseia-se na genética que os reprodutores carregam e que é disseminada para fins comerciais. Dessa forma, a inseminação artificial tem ocorrido paralelamente ao desenvolvimento de novas tecnologias para criopreservação do sêmen de ovinos. A criopreservação é uma excelente técnica para conservação de material genético por tempo indeterminado e foi utilizada pela primeira vez em meados de 1960 como uma alternativa para a preservação da fertilidade. É uma biotécnia que apresenta como vantagem a seleção de material genético desejado e a possibilidade de grande distanciamento temporal e espacial entre o momento da coleta do sêmen e a realização do protocolo de inseminação artificial. Porém, o processo de congelamento e descongelamento da célula espermática pode interferir em sua viabilidade, em decorrência de mudanças estruturais e fisiológicas dos espermatozoides, que podem levar a alterações na conformação lipídica da membrana, danos no DNA e alterações no acrossoma. Considerando que essas alterações podem estar associadas ao estresse oxidativo, protocolos utilizando diluentes de criopreservação suplementados com antioxidantes têm sido testados, a fim de minimizar os danos e atingir maiores taxas de prenhez. Dentre os compostos com efeito antioxidante, o selênio surge como uma alternativa de grande potencial. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a influência de duas formas de selênio (orgânico e inorgânico) na qualidade e viabilidade espermática de sêmen ovino submetido a criopreservação utilizando dois diferentes períodos de resfriamento. Este trabalho teve a aprovação da CEUA-Unipampa (Protocolo 0172019). Foram coletados ejaculados de quatro carneiros saudáveis, usando vagina artificial aquecida a 38°C. O sêmen foi avaliado quanto ao volume, aspecto, motilidade e morfologia e somente as amostras com qualidade comprovada foram utilizadas. Os grupos foram divididos em: grupo controle resfriado por 2h; grupo controle resfriado por 4 horas; grupo selênio orgânico (selenofuranosídeo) e grupo selênio inorgânico (selenito de sódio) esses últimos submetidos a resfriamento de 2h e 4h e suplementados nas concentrações de 0,5 e 1 µg/mL. Portanto, todos os grupos foram submetidos a curvas de resfriamento de 2h e 4h, totalizando 10 grupos. Utilizou-se como diluente Tris-gema para obter uma concentração de 400 x 106 espermatozoides/mL e envasou-se em palhetas de 0,25 mL, onde o sêmen estendido foi embalado manualmente na temperatura ambiente, e após, foram imediatamente resfriados a 5 ° C, por 2 ou 4 horas e, em seguida, foram congeladas em nitrogênio líquido a -196°C. Para as análises, palhetas de cada grupo foram descongeladas em água a 37°C por 30 segundos e submetidas à avaliação cinética e morfológica. A cinética espermática foi avaliada pelo sistema Computer Assisted Semen Analysis (CASA) equipado com o software Sperm Class Analyzer (SCA) (Versão 5.1). Os parâmetros cinéticos analisados foram: motilidade total (TM; %), motilidade progressiva (PM; %), velocidade curvilínea (VCL; µm/s), (LIN; %), amplitude da cabeça lateral deslocamento (ALH; µm), frequência de batimento da cauda (BCF; %) e porcentagem de espermatozoides com movimento rápido (hiperatividade; %). Já em relação à morfologia dos espermatozoides, esta foi analisada com aumento de 1000 × em uma lâmina de vitral com Rosa de Bengala avaliando um total de 200 células/grupo/réplica. A análise estatística foi realizada por meio de Anova de duas vias, seguida de teste Tukey (software GraphPad Prism 8.0.1), considerando estatisticamente significativos os valores com P <0,05. A suplementação do diluente de congelamento com 0,5 µg/mL de selenofuranosídeo submetido a uma curva de resfriamento de 4 horas aumentou a motilidade total dos espermatozoides (80,72% ± 6,51) quando comparado ao grupo controle no mesmo tempo de resfriamento (62,67% ± 6,38) (P = 0,0099). A suplementação com selenito de sódio 0,5 µg/mL no grupo usando a curva de resfriamento de 2 horas mostrou um aumento na motilidade espermática (76,11% ± 14,57) quando comparado ao grupo controle no mesmo tempo de resfriamento (52,73% ± 2,06) (P = 0,0099). Nos demais parâmetros avaliados, não foram observadas alterações significativas em relação ao tempo de resfriamento (2 ou 4 h) e em relação aos tratamentos nas concentrações utilizadas. Na avaliação morfológica, considerando morfologia normal, defeitos maiores e defeitos menores, não foram observadas diferenças significativas em relação a suplementação com selênio bem como em relação às curvas de resfriamento (2 e 4 h). Considerando a importância da motilidade espermática como um parâmetro fundamental para a fertilidade, o estudo indicou que a suplementação com selenito de sódio e selenofuranosídeo, em baixas concentrações, poderia ajudar a melhorar a motilidade total de sêmen de carneiro criopreservado sem influenciar de forma significativa em sua morfologia.Downloads
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Publicado
2021-11-16
Como Citar
ALVES, G.; GAZETA PASSOS, L.; FERREIRA RODRIGUES, J.; DOS SANTOS BRUM, D.; WEBER SANTOS CIBIN, F.; FERREIRA BICCA, D. EFEITO DA UTILIZAÇÃO DE SELÊNIO EM DILUENTE PARA CRIOPRESERVAÇÃO DE SEMÊN OVINO. Anais do Salão Internacional de Ensino, Pesquisa e Extensão, v. 13, n. 3, 16 nov. 2021.
Seção
Artigos